胰岛分离技术
2009年7月15日
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最近到一个医学论坛“丁香园”看了看,在内分泌专栏下,看到一个很火的关于胰岛分离培养与功能测试的帖子,很高兴看到国内开始越来越多地关注胰岛研究。我在胰岛领域已经工作近10年了,每天的工作就是胰岛,从分离培养开始,到做各种各样的实验,我每年大约要分离出10到25万个胰岛,所以很想谈谈自己的感受。
最早的胰岛分离技术见于1967年糖尿病杂志发表的Paul Lacy的文章,描述了如何从大鼠胰腺分离完整胰岛的技术,到现在半个世纪过去了,基本技术还是当年的。总的原理就是把胶原酶注射到老鼠胆管里,但要阻断胆管流入小肠胆胰壶腹(Ampulla of Vater)的通道,所以胶原酶就反流到胰腺导管里,胰外分泌腺被胶原酶消化破坏,胰岛就分离出来了。
我自己用的方法与Lacy的方法尽管原理类似,但还是有很大的不同。我是把Hanks缓冲液注射到胆管里,象吹气球一样用Buffer把胰腺吹起来,大鼠,小鼠都是这样,然后把胰腺剥离下来,放到一边等待消化,这样可以很从容地一只接一只地做,我最多的时候可以一次做10只小老鼠,三只大老鼠。这样做的好处就是可以大规模的分离胰岛,上午10只小鼠,下午10只,每天最多可以分离到5000到10000个小鼠胰岛。 阅读全文…
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